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LEDGFp52影响RGCs生长状态的研究
作者:赵海生 …  文章来源:重庆 第三军医大学西南眼科医院 重庆 400038  点击数2117  更新时间:2007/6/20 16:08:25  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目的 观察在LEDGFp52基因和蛋白两个水平分别给予正负双向调控时,大鼠RGCs单个细胞突起数目及轴突平均长度的变化。 方法 在原代大鼠RGCs培养的基础上,将LEDGFp52(2×10-4g/L)和Ab-LEDGF(2.5×10-4g/L)加入RGCs的无血清培养基中,在LipofectamineTM2000介导下将Ad-LEDGFp52(2.5×10-4g/L)(3×10-4pfu/L) 和siRNA-LEDGFp52(6×10-4g/L)转染进RGC进行LEDGFp52基因和蛋白两个水平的正负双向调控实验,分别在处理后12h、24h、36h、48h、72h 和96h在相差显微镜下观察它们对大鼠RGCs的生长状态,每一时相点的数码图像输入IPP图像分析系统,计数单个RGC突起数目并测量轴突长度,统计数据输入SPSS13.0软件,应用重复测量数据的方差分析判断LEDGFp52基因和蛋白对大鼠RGCs生长的影响,并同时设立CNTF阳性对照和空白对照组。 结果 LEDGFp52在基因和蛋白水平均可调控RGCs生长,表现为正向调节RGCs的单个细胞突起数目显著增多及轴突平均长度显著增长,负向调节RGCs的单个细胞突起数目显著减少及轴突平均长度显著缩短。就正负双向调控RGCs生长时LEDGFp52基因水平和蛋白水平的效能比较,基因水平的调控效能高于蛋白水平的调控效能。 结论 LEDGFp52可显著影响RGC单个细胞突起数目及轴突平均长度,对维持正常RGC生长很重要。LEDGFp52基因和蛋白是RGC的树突化因子。
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