【摘要】 目的 研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)延缓过氧化氢诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium cells,RPE)细胞快速衰老的作用机制。方法 ARPE-19细胞株随机分为对照组、过氧化氢诱导组(模型组)和EPO预处理组。流式细胞术分析细胞周期,计算G1期细胞比率;流式细胞术检测各组细胞线粒体膜电位的变化;分光光度计法检测各组线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性变化;半定量RT-PCR法检测各组衰老相关因子Clusterin的表达变化。结果 过氧化氢诱导组:RPE细胞G1期细胞比率较对照组明显增加(P<0.01),线粒体膜电位较对照组下降(P<0.01),线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅳ活性减弱(P<0.01、P<0.05),Clusterin的表达增强(P<0.01)。EPO预处理组:RPE细胞G1期细胞比率较模型组明显降低(P<0.01),线粒体膜电位较模型组升高(P<0.05),线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性较模型组均有增强(P<0.01、P<0.05、P<0.05、P<0.05),Clusterin的表达较模型组减少(P<0.01)。结论 过氧化氢诱导RPE细胞线粒体功能衰退,导致细胞出现早期衰老的现象。而EPO可以减缓过氧化氢诱导的RPE细胞衰老,其机制可能与增强线粒体功能,减弱衰老相关因子Clusterin的表达有关。 |